ZUSAMMENFASSUNG UND ERKLÄRUNG DES TESTS
Chikungunya ist eine seltene Virusinfektion, die durch den Stich einer infizierten Aedes aegypti-Mücke übertragen wird.Sie ist durch Hautausschlag, Fieber und starke Gelenkschmerzen (Arthralgien) gekennzeichnet, die normalerweise drei bis sieben Tage anhalten.Der Name leitet sich vom Makonde-Wort ab, das „das, was sich beugt“ bedeutet und sich auf die gebeugte Haltung bezieht, die sich als Folge der arthritischen Symptome der Krankheit entwickelt.Es kommt während der Regenzeit vor
in tropischen Gebieten der Welt, vor allem in Afrika, Südostasien, Südindien und Pakistan.Die Symptome sind klinisch meist nicht von denen des Dengue-Fiebers zu unterscheiden.Tatsächlich wurde in Indien über eine Doppelinfektion mit Dengue- und Chikungunya-Fieber berichtet.Im Gegensatz zum Dengue-Fieber sind hämorrhagische Manifestationen relativ selten und in den meisten Fällen handelt es sich um eine selbstlimitierende fieberhafte Erkrankung.Deshalb ist es sehr wichtig
um Dengue-Fieber klinisch von einer CHIK-Infektion zu unterscheiden.CHIK wird auf der Grundlage einer serologischen Analyse und Virusisolierung in Mäusen oder Gewebekulturen diagnostiziert.Ein IgM-Immunoassay ist die praktischste Labortestmethode.Der Chikungunya-IgG/IgM-Schnelltest nutzt rekombinante Antigene, die von seinem Strukturprotein abgeleitet sind. Er erkennt IgG/IgM-Anti-CHIK im Patientenserum oder -plasma innerhalb von 20 Minuten.Der Test kann von Ungeschulten oder durchgeführt werden
minimal qualifiziertes Personal, ohne umständliche Laborausrüstung.
PRINZIP
Der Chikungunya-IgG/IgM+NS1-Antigen-Schnelltest ist ein Lateral-Flow-Chromatographie-Immunoassay.Die Testkassette besteht aus einem IgG/IgM-Streifen und einem NS1-Streifen.
IgG/IgM-Streifen: 1) ein burgunderfarbenes Konjugatpad mit rekombinanten Chikungunya-Hüllantigenen, konjugiert mit kolloidalem Gold (Dengue-Konjugate) und Kaninchen-IgG-Gold-Konjugaten, 2) ein Nitrozellulosemembranstreifen mit zwei Testbanden (G- und M-Banden) und a Kontrollbande (C-Bande).Die G-Bande ist mit dem Antikörper zum Nachweis von IgG-Anti-Chikungunya-Virus vorbeschichtet, die M-Bande ist mit Antikörper zum Nachweis von IgM-Anti-Chikungunya-Virus vorbeschichtet und die C-Bande ist mit Ziegen-Anti-Kaninchen-IgG vorbeschichtet.
NS1-Streifen: 1) ein burgunderfarbenes Konjugatpad mit Maus-Anti-Chikungunya-NS1-Antigen, konjugiert mit kolloidalem Gold (Chikungunya-Ab-Konjugate), 2) ein Nitrozellulosemembranstreifen mit einer Testbande (T-Bande) und einer Kontrollbande (C-Bande).Die T-Bande ist mit Kaninchen-Anti-Chikungunya-NS1-Antigen vorbeschichtet und die C-Bande ist mit Ziege-Anti-Maus-IgG-Antikörper vorbeschichtet.
IgG/IgM-Streifen: Wenn eine ausreichende Menge der Testprobe in die Probenvertiefung der Testkassette gegeben wird, wandert die Probe durch Kapillarwirkung durch die Kassette.Wenn das IgG-Anti-Chikungunya-Virus in der Probe vorhanden ist, bindet es an die Chikungunya-Konjugate.Der Immunkomplex wird dann von dem auf der G-Bande beschichteten Reagenz eingefangen und bildet eine burgunderfarbene G-Bande, die auf ein positives Chikungunya-Virus-IgG-Testergebnis und auf eine kürzliche oder wiederholte Infektion hinweist.Wenn das IgM-Anti-Chikungunya-Virus in der Probe vorhanden ist, bindet es an die Chikungunya-Konjugate.Der Immunkomplex wird dann von dem auf der M-Bande vorbeschichteten Reagenz eingefangen und bildet eine burgunderfarbene M-Bande, die auf ein positives Chikungunya-Virus-IgM-Testergebnis und eine frische Infektion hinweist.Das Fehlen jeglicher Testbanden (G und M) deutet auf ein negatives Ergebnis hin. Der Test enthält eine interne Kontrolle (C-Bande), die eine burgunderfarbene Bande des Immunkomplexes von Ziegen-Anti-Kaninchen-IgG/ aufweisen sollte.
Kaninchen-IgG-Gold-Konjugat, unabhängig von der Farbentwicklung auf einer der T-Banden.Andernfalls ist das Testergebnis ungültig und die Probe muss mit einem anderen Gerät erneut getestet werden.
NS1-Streifen: Wenn eine ausreichende Menge Testprobe in die Probenvertiefung der Kassette gegeben wird, wandert die Probe durch Kapillarwirkung durch die Testkassette.Wenn Chikungunya NS1 Ag in der Probe vorhanden ist, bindet es an die Chikungunya Ab-Konjugate.Der Immunkomplex wird dann durch den vorbeschichteten Kaninchen-Anti-NS1-Antikörper auf der Membran eingefangen und bildet eine burgunderfarbene T-Bande, die auf ein positives Chikungunya Ag-Testergebnis hinweist.Das Fehlen der T-Bande deutet auf ein negatives Ergebnis hin.Der Test enthält eine interne Kontrolle (C-Bande), die unabhängig vom Vorhandensein einer farbigen T-Bande eine burgunderfarbene Bande des Immunkomplexes aus Ziege-Anti-Maus-IgG/Maus-IgG-Gold-Konjugat aufweisen sollte.Andernfalls ist das Testergebnis ungültig und die Probe muss mit einem anderen Gerät erneut getestet werden.
