ZUSAMMENFASSUNG UND ERKLÄRUNG DES TESTS
Malaria ist eine durch Mücken übertragene, hämolytische, fieberhafte Krankheit, die über 200 Millionen Menschen infiziert und mehr als 1 Million Menschen pro Jahr tötet.Es wird durch vier Arten von Plasmodium verursacht: P. falciparum, P. vivax, P. ovale und P. malariae.Diese Plasmodien infizieren und zerstören alle menschliche Erythrozyten und verursachen Schüttelfrost, Fieber, Anämie und Splenomegalie.P. falciparum verursacht schwerwiegendere Erkrankungen als die anderen Plasmodienarten und ist für die meisten Malaria-Todesfälle verantwortlich. Außerdem ist es einer der beiden häufigsten Malaria-Erreger.
Traditionell wird Malaria durch den Nachweis der Organismen auf mit Giemsa gefärbten dicken Ausstrichen peripheren Blutes diagnostiziert, und die verschiedenen Plasmodiumarten werden durch ihr Auftreten in infizierten Erythrozyten unterschieden.Die Technik ermöglicht eine genaue und zuverlässige Diagnose, allerdings nur, wenn sie von erfahrenen Mikroskopikern unter Verwendung definierter Protokolle durchgeführt wird, was für die abgelegenen und armen Gebiete der Welt große Hindernisse darstellt.
Der Pf Ag-Schnelltest wurde zur Lösung dieser Hindernisse entwickelt.Es erkennt das Pf-spezifische Antigen pHRP-II in menschlichen Blutproben.Sie kann von ungeschultem oder nur gering qualifiziertem Personal ohne Laborausrüstung durchgeführt werden.
PRINZIP
Der Pf Ag-Schnelltest ist ein Lateral-Flow-Chromatographie-Immunoassay.Die Bestandteile des Teststreifens bestehen aus: 1) einem burgunderfarbenen Konjugatkissen mit monoklonalem Anti-pHRP-II-Antikörper, konjugiert mit kolloidalem Gold (pHRP II-Gold-Konjugate), 2) einem Nitrozellulosemembranstreifen mit einer Testbande (Pf) und einer Kontrollbande (C-Bande).Die Pf-Bande ist mit polyklonalen Anti-pHRP-II-Antikörpern vorbeschichtet und die C-Bande ist mit Ziegen-Anti-Maus-IgG vorbeschichtet.
Während des Tests wird ein ausreichendes Volumen der Blutprobe in die Probenvertiefung (S) der Testkassette gegeben und ein Lysepuffer in die Puffervertiefung (B) gegeben.Der Puffer enthält ein Detergens, das die roten Blutkörperchen lysiert und das pHRPII-Antigen freisetzt, das durch Kapillarwirkung über den in der Kassette enthaltenen Streifen wandert.Wenn pHRP-II in der Probe vorhanden ist, bindet es an die pHRP II-Gold-Konjugate.Der Immunkomplex wird dann von den vorbeschichteten polyklonalen AntipHRP II-Antikörpern auf der Membran eingefangen und bildet eine burgunderrote Pf-Bande, die auf ein Pf-positives Testergebnis hinweist.
Das Fehlen des Pf-Bandes deutet auf ein negatives Ergebnis hin.Der Test enthält eine interne Kontrolle (C-Bande), die unabhängig von der Farbentwicklung auf einer der Pf-Banden eine burgunderfarbene Bande des Immunkomplexes aus Ziege-Anti-Maus-IgG/Maus-IgG (pHRP II-Gold-Konjugate) aufweisen sollte.Andernfalls ist das Testergebnis ungültig und die Probe muss mit einem anderen Gerät erneut getestet werden.
