ZUSAMMENFASSUNG UND ERKLÄRUNG DES TESTS
Malaria ist eine durch Mücken übertragene, hämolytische, fieberhafte Krankheit, die über 200 Millionen Menschen infiziert und mehr als 1 Million Menschen pro Jahr tötet.Es wird durch vier Arten von Plasmodium verursacht: P. falciparum, P. vivax, P. ovale und P. malariae.Diese Plasmodien infizieren und zerstören alle menschliche Erythrozyten und verursachen Schüttelfrost, Fieber, Anämie und Splenomegalie.P. falciparum verursacht schwerwiegendere Erkrankungen als die anderen Plasmodienarten und ist für die meisten Todesfälle durch Malaria verantwortlich.P. falciparum und P. vivax sind die häufigsten Krankheitserreger, es gibt jedoch erhebliche geografische Unterschiede in der Artenverteilung.
Traditionell wird Malaria durch den Nachweis der Organismen auf mit Giemsa gefärbten dicken Ausstrichen peripheren Blutes diagnostiziert, und die verschiedenen Plasmodiumarten werden durch ihr Auftreten in infizierten Erythrozyten unterschieden.Die Technik ermöglicht eine genaue und zuverlässige Diagnose, allerdings nur, wenn sie von erfahrenen Mikroskopikern unter Verwendung definierter Protokolle durchgeführt wird, was für die abgelegenen und armen Gebiete der Welt große Hindernisse darstellt.
Der Malaria Pf/Pv Ag-Schnelltest wurde zur Lösung dieser Hindernisse entwickelt.Es nutzt Antikörper, die spezifisch für P. falciparum Histidin Rich Protein-II (pHRP-II) und für P. vivax Lactat Dehydrogenase (Pv-LDH) sind, um gleichzeitig eine Infektion mit P. falciparum und P. vivax zu erkennen und zu unterscheiden.Der Test kann von ungeschultem oder gering qualifiziertem Personal ohne Laborausrüstung durchgeführt werden
PRINZIP
Der Malaria Pf/Pv Ag-Schnelltest ist ein Lateral-Flow-Chromatographie-Immunoassay.Die Streifentestkomponenten bestehen aus: 1) einem burgunderfarbenen Konjugatpad, das mit kolloidalem Gold konjugierte Maus-Anti-Pv-LDH-Antikörper (Pv-LDH-Gold-Konjugate) und mit kolloidalem Gold konjugierte Maus-Anti-pHRP-II-Antikörper (pHRP-II-Gold-Konjugate) enthält, 2) einen Nitrozellulosemembranstreifen mit zwei Testbanden (Pv- und Pf-Banden) und einer Kontrollbande (C-Bande).Die Pv-Bande ist mit einem anderen Maus-Anti-Pv-LDH-spezifischen Antikörper zum Nachweis einer Pv-Infektion vorbeschichtet, die Pf-Bande ist mit polyklonalen Anti-pHRP-II-Antikörpern zum Nachweis einer Pf-Infektion vorbeschichtet und die C-Bande ist mit Ziegen-Anti-Maus-IgG beschichtet.
Während des Tests wird ein ausreichendes Volumen der Blutprobe in die Probenvertiefung (S) der Testkassette gegeben und ein Lysepuffer in die Puffervertiefung (B) gegeben.Der Puffer enthält ein Detergens, das die roten Blutkörperchen lysiert und verschiedene Antigene freisetzt, die durch Kapillarwirkung über den in der Kassette enthaltenen Streifen wandern.Wenn Pv-LDH in der Probe vorhanden ist, bindet es an die Pv-LDH-Gold-Konjugate.Der Immunkomplex wird dann vom vorbeschichteten Anti-Pv-LDH-Antikörper auf der Membran eingefangen und bildet eine burgunderfarbene Pv-Bande, die auf ein Pv-positives Testergebnis hinweist.Alternativ bindet pHRP-II, sofern es in der Probe vorhanden ist, an die pHRP-II-Gold-Konjugate.Der Immunkomplex wird dann von den vorbeschichteten Anti-pHRP-II-Antikörpern auf der Membran eingefangen und bildet eine burgunderfarbene Pf-Bande, die auf ein Pf-positives Testergebnis hinweist.Das Fehlen jeglicher Testbanden deutet auf ein negatives Ergebnis hin.Der Test enthält eine interne Kontrolle (C-Bande), die unabhängig von der Farbentwicklung auf einer der Testbanden eine burgunderfarbene Bande des Immunkomplexes aus Ziegen-Anti-Maus-IgG/Maus-IgG (Anti-Pv-LDH und Anti-pHRPII)-Gold-Konjugaten aufweisen sollte.Andernfalls ist das Testergebnis ungültig und die Probe muss mit einem anderen Gerät erneut getestet werden.
